消光系数的测定（Scopes 法）实验

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

Scopes 发表了一种测定蛋白质消光系数（E) 的简便方法（Scopes,1974)。此法基于如下事实，即尽管蛋白质在 205nm 处的吸收大部分是由肽键造成的，但仍有一些吸收取决于其中的氨基酸。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。

来源：丁香实验

操作方法

消光系数的测定（Scopes 法) 实验

材料与设备牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液，浓度约为 1mg/ml 干净的石英比色皿分光光度计，可在 205nm 和 280nm 读数的试剂透析缓冲液 (配方，见"试剂的配制"，PP.184~189) 操作程序 1)BSA 溶液（~1mg/ml) 或未知浓度的待测纯蛋白溶液对 2X400 ml 的透析缓冲液透析 3~5 h, 充分搅拌。 2) 测定 A280nm(应