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简介
Scopes 发表了一种测定蛋白质消光系数(E) 的简便方法(Scopes,1974)。此法基于如下事实,即尽管蛋白质在 205nm 处的吸收大部分是由肽键造成的,但仍有一些吸收取决于其中的氨基酸。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。
来源:丁香实验
操作方法
材料与设备 牛血清白蛋白(BSA) 或σ32 溶液,浓度约为 1mg/ml 干净的石英比色皿 分光光度计,可在 205nm 和 280nm 读数的 试剂 透析缓冲液 (配方,见"试剂的配制",PP.184~189) 操作程序 1)BSA 溶液(~1mg/ml) 或未知浓度的待测纯蛋白溶液对 2X400 ml 的透析缓冲液透析 3~5 h, 充分搅拌。 2) 测定 A280nm(应