硫氧还原蛋白融合蛋白的表达和纯化实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

以大肠杆菌trxA基因产物-硫氧还蛋白作为融合伴侣的基因融合表达系统，特别适用于在大肠杆菌胞质中表达髙产量的可溶性融合蛋白。

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 将编码目的序列的DNA片段克隆于pTRXFUS或hpTRXFUS质粒上的trxA基因3‘末端，构建符合读框的融合基因，或者于pALtrxA-781的单一Rsr 2位点上插入短肽编码序列。 2. 用含有重组硫氧还蛋白融合蛋白的质粒的连接混合液，转化感受态GI724细胞。转化的细胞种入含100 μg/ml氨苄青霉素的IMC培养皿选择转化子，把培养皿放在30℃对流培养箱中温育，