谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的表达及纯化实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

pGEX载体可用于表达和纯化用作免疫原和生化、生物试剂的多肽（包括短肽），或用cDNA构建表达文库。每个pGEX载体都有一个编码谷胱甘肽S-转移酶的开放阅读框，其后有单一限制性内切酶位点，然后是相应于三个阅读框的终止密码子。

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 按正确读框将DNA片段亚克隆入合适的pGEX载体中，转化大肠杆菌感受态细胞，在LB/氨苄青霉素平皿上筛选转化子，以不插入外源DNA的自连载体作对照，平皿置37℃孵育12~15 h。 2. 挑取转化菌落接种于2 ml LB/氨苄青霉素培养基，并在氨苄青霉素主平板上划线培养。同时接种含母本pGEX载体的转化菌作对照。将主平板于37℃下温育12~15 h。液体培养物则于37℃摇床中