光活化的核苷酸类似物介导的 RNA- 蛋白的交联实验

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线（254 nm ) 照射时，RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应，转变为活性状态，进而形成分子间共价交联。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

光活化的核苷酸类似物介导的RNA-蛋白的交联实验

―、材料与设备 1. 全长含核苷酸类似物的 RNA 合成所有的缓冲液配制均需采用经过蒸馏并灭菌的去离子水 (1) 缓冲液 A：20 mmol/L Tris-HAc ( pH 8.0 )，10 mmol/L Mg(Ac)2，50 mmol/L 谷氨酸钾。 (2) 5% (V/V) 甘油，40 mmoI/L Na2EDTA ( pH 8.0 )，40 μg/mL 乙酰化牛血清白蛋白，-20℃