部分分解多肽两端有关的 PCR 法筛选 PK-120 基因实验

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

部分分解多肽氨基酸序列 20 个左右残基长度，用编码多肽两端的 PCR 引物进行 PCR 反应，能够检测 PCR 产物的长度，用此法得到的 cDNA 只有几十个碱基对，但它将成为后续筛选基因的重要突破口。

来源：《蛋白质技术手册》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

实验所需「试剂」具体见「其他」1. 引物设计PK-120 部分分解多肽氨基酸序列中，最长序列 K-15，16 为引物设计的依据：1.1 考虑全部编码的组合，1.2 考虑人编码的使用频率，设计 PCR 引物，正义链及反义链如用这些引物获得的 PCR 产物当中，50 bp 的产物为目的 cDNA。2. PCR 扩增从肝脏来源的 poly（A）+ RNA 中，用 Gene Amp RNA PCR 试剂盒