加入接头实验

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

通过让两个互补的引物退火构建接头，首先应使引物 1B 和 2B 的 5'末端磷酸化。
现代神经科学研究技术
作者：U.Windhorst & H. Johansson 翻译：赵志奇陈军

来源：丁香实验

操作方法

加入接头实验

1.稀释引物IB和2B, 至质量浓度为350ng/V。 2.加入下列试剂进行引物5’末端磷酸化： 3.在37℃ 下孵育30 min。 4.在65℃ 下放置 10 min热失活PNKo 5.将36ul 的引物IA加入到80ul磷酸化的引物1B中，同样加36ul引物2A到磷酸化的2B(终浓度为217ng/ul)。 6.使引物退火：先加热到9