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镜像方向选择实验

实验分类:

PCR 技术

最新修订时间:

简介

SSH 的主要缺点是,在消减文库中存在代表非差异表达 DNA 种类的背景克隆。在某些情况下,背景克隆的数量可能大大超过目的克隆。为了克服这个问题,推荐镜像方向选择(MOS)。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。

来源:丁香实验

操作方法

镜像方向选择实验

第 1 阶段:用于 MOS 和 XmaⅠ消化的 PCR 扩增 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 EDTA,0.2mol/L 矿物油 TN 缓冲液(10 mmol/LTris-HCl、pH7.6,10mmol/LNaCl) 2. 酶和酶缓冲液 PCR 缓冲液,10X(40 mmol/LTricine-KOH、22°C 下 pH9.2,3.5 mmol/L 乙酸镁,10mmol/L 乙

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