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消减 cDNA 或基因组 DNA 文库的制备实验

实验分类:

PCR 技术

最新修订时间:

简介

一次双向消减,需要总量为 2ug 的基因组 DNA 或 cDNA。大多数分离 RNA 和基因组DNA 的方法都适用于本实验(Sambrooketal.1989;ChomczynskiandSacchi1987;Farrell1993)。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。

来源:丁香实验

操作方法

消减 cDNA 或基因组 DNA 文库的制备实验

第1阶段:RNA和DNA的分离 一次双向消减,需要总量为2ug的基因组DNA或cDNA。大多数分离RNA和基因组DNA的方法都适用于本实验(Sambrooketal.1989;Chomczynskiand Sacchi 1987;Farrell1993)。如果可能,尽可能使用同样的试剂和方案纯化待比较的样品。如果是基因组DNA作为初始材料,下一步为RsaⅠ 消化(本方案的第3阶段);如果是RNA

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