竞争性 RT-PCR: 竞争子 RNA 的构建实验

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

第一部分：竞争子的设计；第二部分：竞争子RNA的合成、纯化和定量。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

竞争性 RT-PCR: 竞争子 RNA 的构建实验

一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇去除 RNA 酶的双蒸水 2. 核酸和寡核苷酸 DNA 模板（0.5~1.0ug 线性化的质粒模板或 0.1~0.5ugPCR 模板） 3. 放射性复合物 [a-32P]ATP(10mCi/ml)(lCi=37 GBq) 4. 实验器材 RT-PCR 竞争子构建试剂盒（Ambion; 包括 T7RNA 聚合酶、10 倍的转录缓冲液、5 倍