大片段的精确扩增实验

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

用 10 对不同的引物扩增约 5kb 的片段，模板 DNA 是一样的，反应体系是 50ul, 对照中未加模板，含有单一引物。对于循环数较多（25〜40) 的反应，一般应设置一个没有模板或单引物对照。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

大片段的精确扩增实验

一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂灭菌水配制的下列试剂，储存在指定的温度条件下。 (1) 5mol/L 甜菜碱（SigmaB-2629 或 SigmaB-2754) 过滤灭菌，室溫保存。 (2) 10XKLA PCR 反应缓冲液，pH9.2 500 mmol/LTris 碱 (Sigma;Trizma 碱) 169 mmol/L(NH)4SO4 25 mmol/LMgCl2 1%Tween20