实验分类:DNA 实验
最新修订时间:2022-02-10
简介
来源:丁香实验
操作方法
一、制备地高辛标记的探针 将 cDNAs 克隆入 pBluescript 载体中。为了能在体外转录,质粒需经线性化或 PCR 然后根据插入 cDNA 的方向应用 T3 或 T7RNA 聚合酶合成反义 RNA 探针。体外转录之后,DNA 模板用 DNA 酶 I(无 RNA 酶)降解,cDNA 水解成大约 200 个核苷酸的片段。 质粒的线性化:用合适的限制性内切酶在紧邻插入
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