放射性标记的探针与固定在膜上的核酸的 Southern 杂交

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

Southern 杂交获得的信号强度取决于若干因素，包括固定的 DNA 与探针互补的比例、探针的大小及特异活性以及转移到膜上的基因组 DNA 的数量。在最佳条件下，这种方法的敏感度足以检测到与 ³²P 标记的高度特异（>10⁹ cpm/μg）的探针互补的<0.1 pg 的 DNA。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

放射性标记的探针与固定在膜上的核酸的Southern杂交

一、材料 1. 缓冲液及溶液磷酸-SDS 洗液 1（40 mmol/L Na3PO4 （pH 7.2)，1 mmol/L EDTA ( pH 8.0)，5% (m/V) SDS，0.5 (m/V)牛血清白蛋白成分 V）磷酸-SDS 洗液 2（40 mmol/L Na3PO4 （pH 7.2)，1 mmol/L EDTA ( pH 8.0)，5% (m/V) SDS）预杂交/杂交液