Southern 印迹(毛细管法将 DNA 转移到膜上)

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

制备基因组 DNA 样品首先要经过一种或多种限制性内切核酸酶的消化，消化后的片段在标准的琼脂糖凝胶上经电泳按照大小进行分离。DNA 经过原位变性后，从凝胶上转移到固相支持物上（通常为尼龙膜或者硝酸纤维素膜）。DNA 片段在向膜转移的过程中被保留于相应的位置。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

Southern印迹(毛细管法将DNA转移到膜上)

一、材料 1. 缓冲液及溶液碱性转移缓冲液（应用于尼龙膜的碱性转移）（0.4 mol/L NaOH，1 mol/L NaCl）变性溶液（应用于中性转移）（1.5 mol/L NaCl，0.5 mol/L NaOH，HCl ( 0.2 mol/L)，应用于 DNA 的脱嘌呤）中和缓冲液Ⅰ( 应用于不带电荷的尼龙膜的转移）（1 mol/L Tris ( pH 7.4)，1.5 mol/L