脉冲场凝胶电泳的分子质量标准

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

PFGE 用于分离很大的 DNA 分子，因而需要很高分子质量的标准。这种标准可以按照 Lauer 等（1977 ) 介绍的方法从噬菌体，如 T7 (40kb)、T2 (166kb）和 G (758kb) 提取获得。但是一个更好的覆盖范围更广的系列标准是 λ 噬菌体 DNA 的系列串联体。后面介绍的具体步骤是 Vdlrath 和 Davis (1987) 方法的改进。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

脉冲场凝胶电泳的分子质量标准

一、材料 1. 缓冲液和溶液 ATP ( 0.1 mol/L) Dithiothreitol ( 1 mol/L) EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.0) 含聚乙二醇的 1X 连接缓冲液（50 mmol/L Tris-Cl (pH7.6)，1 mmol/L ATP，10 mmol/L 二硫苏糖醇(DTT)，10 mmol/L MgCl2，2% PEG 8000）低熔点琼脂