脉冲场凝胶电泳制备 DNA（酵母完整 DNA 的分离）

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

制备用于电泳的酵母 DNA，先用酶破坏酵母细胞胞壁，然后在熔化的低熔点琼脂糖中混悬，制成栓。将栓浸入含蛋白酶的裂解缓冲液，以加速细胞裂解和除去蛋白质。此方法在 Schwartz 和 Cantor (1984) 最初介绍的方法上略有改进，它可用于制备作为高分子质量标准的酵母染色体和酵母人工染色体（YAC)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

脉冲场凝胶电泳制备DNA（酵母完整DNA的分离）

一、材料 1. 缓冲液和溶液细胞清洗缓冲液（0.01 mol/L Tris-Cl ( pH 7.6)，0.05 mol/L EDTA ( pH 8.0)，室温存放。） EDTA ( 0.05 mol/L, pH 8.0) L 缓冲液（0.1 mol/L EDTA ( pH 8.0)，0.01 mol/L Tris-Cl ( pH 7.6)，0.02 mol/L NaCl，4℃ 存放）