低熔点琼脂糖凝胶中 DNA 的回收（用琼脂糖酶消化）

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中，琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解为双糖。这样获得的 DNA 再经酚抽提、乙醇沉淀进行纯化。由于该法较为温和，因此特别适用从脉冲场琼脂糖凝胶中回收高分子质量的 DNA，从恒强电场琼脂糖凝胶中回收小分子 DNA 也同样有效。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（用琼脂糖酶消化）

一、材料 1. 缓冲液和瑢液乙醇溴化乙锭或 SYBR Gold 染色液凝胶平衡缓冲液（10 mmol/L Bis Tris-Cl ( pH 6.5)，5 mmol/L EDTA ( pH 8.0)，0.1 mol/L NaCl） NaCl ( 5 mol/L) 平衡酚（pH 8.0) TE ( pH 8.0) 2. 酶及缓冲液琼脂糖酶 3. 核酸和寡核苷酸 DNA 样