阴离子交换色谱纯化从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶回收的 DNA

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

从琼脂糖凝胶中回收的 DNA 片段，如 PCR 产物或酶切 DNA 片段，对进一步酶切具有一定的抗性。这种抗性产生的原因是多方面的，通常将其归为抑制剂的存在。经带正电荷的离子交换树脂纯化的双链 DNA 可有效去除样品中的抑制剂。在低离子强度的缓冲液中，带负电的 DNA 结合到带正电的基质上。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

阴离子交换色谱纯化从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶回收的DNA

一、材料 1. 缓冲液和溶液乙醇异丙醇酚：氯仿（1:1, V/V) TE ( pH 7.6) TE ( pH 7.6) 含 0.1 mol/L NaCl TE ( pH 7.6) 含 0.2 mol/L NaCl TE ( pH 7.6) 含 0.3 mol/L NaCl TE ( pH 7.6) 含 0.6 mol/L NaCl 2. 核酸与寡核苷酸 DNA 样品应溶