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琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中DNA的回收(电洗脱至透析袋)

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

这种技术(McDonell et al. 1977 ) 可以从琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶切片回收分子质量范围较宽的双链 DNA,并且产量较高。这种方法多少有些麻烦,必须将凝胶切片单独放入透析袋,因此不能用于回收多种 DNA 样品。但是电洗脱效果很好可以避免其他方法所遇到的问题。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中DNA的回收(电洗脱至透析袋)

一、材料 1. 缓冲液和溶液 乙醇 EB 或 SYBR Gold 染色液 酚:氯仿(1:1 , V/V) 乙酸钠(3 mol/L, pH 5.2) 0.25X TBE 电泳缓冲液 含 0.5 μg/ml 溴化乙锭的 0.25 X TBE 电泳缓冲液 2. 酶和缓冲液 限制性内切核酸酶 3. 凝胶 琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶 4. 核酸和寡核苷酸 DNA 样品 5. 专用设备

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