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用大片段基因组 DNA 克隆直接筛选 cDNA实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

本方案使用克隆在 BAC 载体上的一段 500kb 的人基因组 DNA 连续序列,直接筛选与其互补的的 cDNA。但本方法也可适用于任意大小的基因组靶 DNA。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。

来源:丁香实验

操作方法

用大片段基因组 DNA 克隆直接筛选 cDNA实验

材料 缓冲液与溶液 10x 扩增缓冲液 缓冲液中含有 0.01%(m/V) 的明胶 ATP(10 mmol/L) 2X 杂交液 1.5mol/L NaCl 40 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH7.2) 10 mmol/L EDTA(pH6.0) 10xDehardt’s 液 0.2%SDS NaOH(0.lmol/L) 1X 缺口平移缓冲液 500 mmol/LTris-HCl(pH7

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