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外显子捕获与扩增
最新修订时间：
简介
本方案以哺乳动物穿梭载体 pSPL3 为例，描述了外显子扩增的方法，内容分为以下五个阶段。阶段 1: 文库的构建; 阶段 2: 电穿孔法将文库转染 COS-7 细胞; 阶段 3:mRNA 的提取; 阶段 4: 反转录 PCR; 阶段 5: 克隆分析。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：黄培堂。
来源：丁香实验
操作方法
阶段 1: 文库的构建 材料 缓冲液与溶液 按合适比例稀释贮存液。 ATP(10 mmol/L) 酚：氯仿（1:1,V/V) TE(pH8.0) 酶及缓冲液 PvuⅡ 限制性内切核酸酶 pSPL3 多克隆位点图谱见图 11-16 T4DNA 连接酶 凝胶 琼脂糖凝胶（0.9%m/V), 用 TAE 配制 见步骤 3 琼脂糖凝胶，预制 见步骤 1 核酸与寡核苷酸 黏粒载
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