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用Sep-Pak C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

本方案介绍的是利用寡核苷酸对于硅胶反相亲和的特性,将放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物分离的方法,本方案的方法只可用于纯化 5'端放射性标记或非标记的含磷酸基团的寡核苷酸,而方案 1 所介绍的方法多用于 5'末端为游离羟基的寡核苷酸。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。

来源:丁香实验

操作方法

用Sep-Pak C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

材料 溶液和缓冲液 稀释贮存液至适当浓度。 乙腈(5%、30% 和 100%) 毎个 Sep-Pak C18 柱用 10 ml 髙效液相(HPLC) 级乙腈(100%), 使用前用水稀释乙腈。 碳酸氢铵(25 mmol/L,pH8.0) 含 5%(WV) 乙腈的碳酸氢铵(25 mmol/L,pH8.0) 将 5 ml 乙腈与 95 ml25 mmol/L 碳酸氢铵混合 TE 溶液(pH7

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