CPB 沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案介绍用阳离子去污剂——十六烧基溴化吡啶（cetylpyridinium bromide,CPB) 定量差异沉淀分离放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物。此方法最初是用于回收磷酸缓冲液从羟磷灰石柱洗脱的 DNA(Geek and Nasz 1983), 也可用于沉淀放射性标记核酸包括寡核苷酸。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册，作者：黄培堂。

来源：丁香实验

操作方法

CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。十六烷基溴化吡啶（CPB)1%,m/V) 将 1 gCPBW(sigma 公司）溶于 100 ml 水中，加热并用磁力搅拌器搅拌溶液可加速溶解。待去污剂全部溶解后，将溶液冷却至室溫，用硝酸纤维素滤膜过滤（0.45um 孔径） EDTA-Tris(0.5mol/L,pH6.0) 用 60 ml 水溶解 0.1mol EDTA, 在搅拌溶液的同时, 加