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乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

如果放射性标记的寡核苷酸只是用作杂交探针的话,一般不必完全除去未掺入的放射性标记物。然而,为了使本底降至最低,应该将未掺入的大部分放射性标记物与放射性标记的寡核苷酸分离。如果寡核苷酸长度超过 18 个核苷酸(本方案),则绝大部分未反应的放射性前体物质可通过乙醇分级沉淀除去。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。

来源:丁香实验

操作方法

乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

材料 溶液和缓冲液 稀释贮存液至适当浓度。 乙酸铵(1mol/L) 乙醇 TE(pH7.6) 核酸和寡核苷酸 放射性标记的寡核苷酸 纯化的原料是方案 2(步驟 3 或步骤 5) 的反应混合液,T4 噬菌体多核苷酸激酶巳在 68°C 加热后灭活。 方法 1. 放射性标记的寡核苷酸的管中加入 40ul 水,充分混匀,再加入 240ul 5mol/L 的乙酸铵溶液。再次混匀后,加入用冰

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