利用 PCR 分析酵母菌落

一、材料1. 缓冲液和溶液10X 菌落 PCR 缓冲液dNTP 溶液（10 mmol/L), 含有 4 种 dNTP ( pH 8.0，PCR 级）MgCl2 ( 25 mmol/L)2. 酶及其缓冲液Taq DNA 聚合酶3. 凝胶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶4. 核酸和寡核苷酸寡核苷酸引物DNA 标准参照物5. 专用设备微量离心管（0.5 ml)储存有所需 PCR 方案的程控式 PCR 仪6.

1、单个反应体系 PCR 混合液的制备（1）Taq buffer（10 x）2.5 μl（2）dNTP（2.5 mM）2 μl（3）Primer Forward（引物浓度在 10 pmol/μl）1 μl（4）Primer Reverse（引物浓度在 10 pmol/μl）1 μl（5）ddH2O 18 μl（6）Taq（2 U/μl）0.5 μl2、用高压灭菌的 10 μl 枪头挑取菌体培养平板