P1 噬菌体克隆在大肠杆菌宿主间的转移

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

从不同大肠杆菌菌株中获得的 P1 噬菌体 DNA 的产量与质量取决于宿主菌的基因型和重组子中外源 DNA 的特定序列。将 P1 或 PAC 重组子转化到不表达 Cre 重组酶的大肠杆菌菌株中有时可以解决低产或劣质的问题（如 NS3516; Sternberg et al. 1994)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

P1 噬菌体克隆在大肠杆菌宿主间的转移

一、材料 1. 酶与缓冲液限制性内切核酸酶 2. 凝胶琼脂糖凝胶 3. 培养基含 25 μg/ml 卡那霉素的 LB 琼脂平板 SOC 培养基含 25 μg/ml 卡那霉素的 TB 培养基 4. 专用设备电穿孔仪 5. 载体和菌株闭环重组 P1 DNA 冷冻保存的电转感受态大肠杆菌细胞（如 DH10B ) 二、方法 1. 用无菌水将 2~3 μg P1