哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定实验可以用于：（1）测量动物组织中荧光素酶的含量；（2）测量其他如 CAT、β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶的酶活性。

来源：丁香实验

操作方法

哺乳动物细胞抽提物中荧光素酶的测定实验

1. 转染后 24-72 h, 室温下用不含钙盐和镁盐的磷酸盐缓冲液（PBS）洗细胞 3 次。PBS 换液时要轻缓，因为有些哺乳动物细胞（如人胎肾 293 细胞）在剧烈吹打时很容易从培养皿上脱落下来。通常，荧光素酶基因在转染细胞中获得最大表达量的时间是 24-72 h。2. 每个 100 mm 培养皿中的转染细胞，加入 lml 冰冷的裂解缓冲液。缓冲液轻轻旋转，然后用橡胶棒把裂解细胞从培养皿上