单链和双链 M13 噬菌体 DNA 的大规模制备

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA，因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体，以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA，如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备

一、材料 1. 缓冲液和溶液乙醇 NaCl （固体）酚酚：氯仿（1：1，V/V) 聚乙二醇（20%，m/V，PEG 8000) 溶于水。乙酸钠（3 mol/L，pH 5.2） STE TE ( pH 8.0) Tris-HCl ( 10 mmol/L, pH 8.0) 2. 凝胶琼脂糖凝胶（1.2%) 悬于 0.5 X TBE，含 0.5 μg/ml 溴化乙锭