M13 噬菌体单链 DNA 的制备

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的，首先在高盐存在下，丝状病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀浓缩，然后用酚抽提释放单链 DNA，最后乙醇沉淀收集单链 DNA。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

M13噬菌体单链DNA的制备

一、材料 1. 缓冲液和溶液氯仿乙醇酚聚乙二醇 8000 ( 20%，m/V，PEG 8000 ) 溶于 2.5 mol/L NaCl。乙酸钠（3 mol/L, pH 5.2) 蔗糖凝胶上样缓冲液 TE ( pH 8.0) 2. 凝胶琼脂糖凝胶（1.2%) 悬于 0.5 X TBE，含 0.5 μg/ml 溴化乙锭 3. 核酸和寡核苷酸重组 DNA 的 M13