λ噬菌体臂与外源基因组 DNA 片段的连接实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

当 λ 噬菌体臂与外源基因组 DNA 片段相连时，必须考虑到两个参数：噬菌体臂与潜在插入片段的摩尔比，以及在反应混合物中各类 DNA 的浓度。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

λ噬菌体臂与外源基因组DNA片段的连接实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液 ATP ( 10 mmol/L) SM 和 SM+ 明胶 2. 酶和缓冲液噬菌体 T4 DNA 连接酶 3. 凝胶琼脂糖凝胶（0.7%）, 用 0.5X TBE, 含 0.5 μg/ml 溴化乙锭 4. 核酸和寡核苷酸适当大小的基因组 DNA，用于载体克隆 5. 培养基 LB 或 NZCYM 琼脂平板 LB 或 NZCYM 顶层琼脂糖