磷酸钙介导的高分子量基因组 DNA 转染细胞实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

下述方法是对 Graham 与 Van der Eb(1973) 建立的磷酸转方法的改进，用高分子量基因组 DNA 代替了质粒 DNA。这一方法对建立稳定的携带补充宿主染色体基因突变的转染基因的细胞系尤其有用（Segeetal.1984,Kingsley et al.1986)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

磷酸钙介导的高分子量基因组 DNA 转染细胞实验

材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所浓度。 CaCl2(2mol/L) 过滤除菌，分装成 5 ml 的等份冻存。甘油（15%V/V)1XHEPES 盐缓冲液。 HEPES 盐溶液过滤除菌，使用前加入离压灭绝的 15% 的甘柚。 HEPES 盐缓冲液 21 mmol/LHEPES 0.7 mmol/LNa2 HPO4 137 mmol/LNaCl 5