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简介
不管高分子质量 DNA 的碱基组成与序列如何,通过水压机械剪切(hydrodynamic shearing) 均可将其以半随机形式片段化。但是,用这种方法制备的 DNA 需进行一系列酶反应操作(末端修复、甲基化、接头连接、接头消化)以保护内部限制位点,以及产生一些黏性末端。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。
来源:丁香实验
操作方法
一、材料 1. 缓冲液和溶液 蔗糖凝胶上样缓冲液 Tris-Cl (10 mmol/L, pH 8.0) 2. 酶和缓冲液 限制性内切核酸酶 3. 凝胶 琼脂糖凝胶(0.6%),用 0.5X TBE,含 0.5 μg/ml 溴化乙锭 琼脂糖凝胶,用于脉冲场凝胶电泳 4. 核酸和寡核苷酸 基因组 DNA,高分子质量 λ 噬菌体 DNA 和质粒寡聚体 5. 专用设备 毛细管,
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