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通过 CsCl 等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒,它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是,由它所获得的噬菌体原种是高度浓缩的(大于 1011 cfu/ml),在 4℃ 保存时,许多年后仍能保持它们的感染力。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

通过CsCl 等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液 (1) CsCl(固体) (2) CsCl 溶液 (3) 乙醇 2. 离心机和转子 (1) Beckman SW41 或 SW28 转子或相当型号 (2) Beckman Ti50 或 SW50.1 转子或相当型号,配有清亮的离心管(如 Beckman 超亮离心管) 3. 专用设备 皮下注射用针头(21号) 4. 载体和菌株 λ 噬菌体悬浮液

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