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用 T7 噬菌体启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

Tabor 和 Richardson 在 1985 年及 Studier 和 Moffatt 在 1986 年提出了一个新的利用 T7 噬菌体启动子的表达系统,使用的是从 T7 噬菌体基因组获得的转录信号。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源:丁香实验

操作方法

用 T7 噬菌体启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

材料 缓冲液和溶液 贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录1。 贮存液稀释至适当浓度。 考马斯亮蓝染色溶液或银染溶液 参见附录8。 IPTG(1mol/L) 1XSDS凝胶加样缓冲液 不含DTT的1xSDS加样缓冲液室温保存,1mol/LDTT贮存液现用现加于上述缓冲液。 凝胶 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(10%) 用于分离蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备参考附录8。 核酸和寡核苷酸

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