用 T7 噬菌体启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

Tabor 和 Richardson 在 1985 年及 Studier 和 Moffatt 在 1986 年提出了一个新的利用 T7 噬菌体启动子的表达系统，使用的是从 T7 噬菌体基因组获得的转录信号。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

用 T7 噬菌体启动子在大肠杆菌中表达克隆基因实验

材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的成分参见附录1。贮存液稀释至适当浓度。考马斯亮蓝染色溶液或银染溶液参见附录8。 IPTG(1mol/L) 1XSDS凝胶加样缓冲液不含DTT的1xSDS加样缓冲液室温保存，1mol/LDTT贮存液现用现加于上述缓冲液。凝胶 SDS-聚丙烯酰胺凝胶（10%) 用于分离蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备参考附录8。核酸和寡核苷酸