利用 λ 噬菌体文库筛选 DNA 结合蛋白实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

可利用合成双链寡核苷酸筛选构建于λ噬菌体的 cDNA 表达文库，以鉴定与特异 DNA 结合蛋白质相对应的克隆（Singhetal.1988,Vinsonetal.1988)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

利用λ噬菌体文库筛选 DNA 结合蛋白实验

材料缓冲液和溶液贮存液, 缓冲液和试剂的组分请见附录 1。将贮存液稀释到适当的浓度。 ATP(100 mmol/L) 用 25 mmol/L Tris-Cl(pH8.0) 稀释 100 mml/L 贮存液分别配制 10 mmol/L 和 50 mmol/L 两种浓度的 ATP 溶液。 10X 结合缓冲液 250 mmol/LHEPES(pH7.9) 30 mmol/LMgCl2 40