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配制电解质梯度胶实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

Sheen 和 Seed(1980) 创造了一种既聪明又简单的改进方法,利用顶部和底部不同浓度的电泳缓冲液在胶中产生离子梯度,而胶本身的浓度是一定的。利用此法,从单块凝胶上可以读取的核苷酸总数可增加约 30%。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源:丁香实验

操作方法

配制电解质梯度胶实验

材料 本方法包括方案 8 中所有物品,加上: 甲酰胺(100%) 离子梯度胶用 1XTBE 配制,有无甲酰胺均可。关于含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,请见方案 9。 醋酸钠(3mol/L,PH7.0) 方法 1. 依方案 8 步骤 1~8。 2. 在实验桌的工作区上铺上衬塑料的保护纸。 3. 参照方案 8 或 9 配制变性聚丙烯酰胺凝胶。 4. 将胶放在电泳装置中。在上槽中加入 0.5X

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