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建立随机重叠 DNA 插入文库实验
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简介
下面的方案描述了鸟枪法测序的起始步骤，从靶 DNA 的剪切到用 M13 噬菌体载体构建 DNA 片段文库，也包括断裂靶 DNA 的两种方法--超声法和喷雾法，以及用 DNA 聚合酶修复片段末端的技术要点。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。
来源：丁香实验
操作方法
材料 缓冲液和溶液 乙酸铵（10mol/L) ATP 乙醇 甘油（无菌，100%) 水（去离子蒸馏水） IPTG MgCl2 NaCl 酚（pH7.6 Tris 饱和） 酚：氯仿（1:1,m/V) 聚乙二醇（30% m/V PEG 8000) 溶于 2.5mol/LNaCl 可选用，参见步骤 1 聚乙二醇（20% m/V PEG 8000) 溶于 2.5mol/LNaCl
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