DNA 的接头分区诱变实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

Linker scanner mutations （接头分区突变）：体外在限制性片段加上位点，使两个DNA分子发生重组产生，结果在重组的位点加上连接序列。

来源：丁香实验

操作方法

嵌套缺失和互补寡核苷酸进行接头分区诱变

1. 用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核酸酶在质粒的目的区域产生一嵌套式的5’或3端'缺失突变体。首先在目的序列附近用一限制酶使质粒线性化，在用Bal 31消化时，应确定其切割效率，以便弄清毎切割6~8个目的碱基对和覆盖待诱变区所需的时间。 2. 将合成接头与经适当时间酶切处理的DNA连接。用适当的限制酶进行切割以产生在缺失末端上带有接头而在另一端上含有载体位点的片段。 3.