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简介
标准的双脱氧DNA测序可以很容易和很有效地使用非同位索标记的化学发光法进行检测。在测序反应中,使用生物素标记的引物。用非同位素标记如生物素衍生化的引物,可用于为5’-末端标记引物而设的入测序反应的工作方案。
来源:丁香实验
操作方法
1. 在微量离心管中混匀下列试剂,配制DNA摸板混合物 (1)1 μg 单链DNA模板或1~3 μg 变性双链DNA模板 (2)0.5 pmol 生物素酰化DNA测序引物 (3)2 μl 5×Bst反应缓冲液 (4)加水至11 μl (5)加热至70℃,然后在30 min 以上的时间內,慢慢冷却至30 ℃ 2. 当模板混合物冷却的同时,各取2