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简介
DNA文库的构建和筛选可以用于:(1)将某生物的全部基因组DNA用限制性内切酶或机械力量切割成一定长度的DNA片段,再与适合的载体在体外重组并转化相应的宿主细胞获得的所有阳性菌落。 (2)采用“化整为零”策略,将庞大的基因分解成一段段,每段包含一个或几个基因。
来源:丁香实验
操作方法
1.水稻 DNA 的提取水稻 DNA 的提取参照 Dellaporta, Wood 和 Hicks (1983) 法分离总基因组DNA并略有修改。 通过 0.8% 琼脂糖凝胶电泳测定分子量。 2.基因文库的构建。以限制性内切酶γEcoRI 消化水稻基因组 DNA12 h, 然后从胶中回收 0.5~ 8kb片段, 连接到γExCell EcoR I/ CIP载体上, 体外包装并感染受体菌NM52