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EMSA加了竞争探针孔没条带

相关实验:DNA 探针的非同位素标记技术

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我爱学习我非常爱

EMSA结果好奇怪

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2 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

在封闭和洗涤的时候整个膜不是很均匀的话就会没条带

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loveliufudan

有帮助

可能有以下几个原因:

竞争探针浓度过高或过低:竞争探针的浓度应该是与被检测探针浓度相当的,如果竞争探针浓度过高,可能会完全竞争掉被检测探针的结合,导致没有条带。反之,如果竞争探针浓度过低,可能不足以完全竞争掉被检测探针的结合,导致仍会有条带出现。

竞争探针的序列不够特异:竞争探针的序列应该与被检测探针的序列具有一定的相似性,但又不能太相似,否则可能会导致竞争探针与被检测探针都结合到同一个蛋白上,导致没有条带。如果竞争探针的序列不够特异,可能会导致其他蛋白质也能够与其结合,进而影响结果。

样品中存在其他的结合蛋白:如果样品中存在其他的结合蛋白,竞争探针可能会与其结合而不是被检测探针结合的蛋白,导致没有条带。

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