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各位大神:我的PK-15细胞26号传代,27号换液,28号下午处理的时候发现细胞不贴壁了,轻轻晃培养瓶就成片脱落 ,显微镜下观察细胞变暗且有众多黑色颗粒感,请问这是哪个环节出现了问题?应该怎么避免或解决呢?万分感谢!!!
sswei
培养过程中有污染,严格无菌下重做实验。
天一湖医者
如果冻存时间不是很长、冻存期间也没有没生过什么意外的情况,那么就要考虑是冻存前的细胞状态就不好;还有就是污染引起。
毛利小五郎的徒弟
考虑目前存在污染,建议先把污染去除再重新培养
huarenqiang5
你这个情况可能是存在细菌污染了,建议及时消毒处理一下。
loveliufudan
根据您提供的情况,可能出现了以下问题:
细胞过度生长:您的PK-15细胞已经传代到第26代,如果没有对细胞进行及时分割,细胞会过度生长,导致细胞密度过高,细胞无法获得足够的养分和空气,从而造成细胞的脱落。
感染:如果细胞培养过程中出现了细菌、真菌或病毒的感染,也会导致细胞变暗且有众多黑色颗粒感。
为了避免或解决这些问题,您可以尝试以下方法:
定期检查细胞密度和健康状态,及时分割和更换培养基。
确保操作环境的卫生和洁净,以避免细菌、真菌或病毒感染。
如果您怀疑细胞感染,可以进行细菌、真菌或病毒检测,并及时采取相应的措施。
如果细胞已经出现了脱落和黑色颗粒的现象,建议重新进行细胞分离和培养,或者更换一批新的细胞株进行培养。