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科研学霸天团，48小时有问必答

问求糖肾小鼠的肾脏冰冻切片

毛利小五郎的徒弟

我有糖肾小鼠的肾脏冰冻切片，可以共享。

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问想请问大家，采集大鼠24h尿液用于测尿蛋白，不能及时检测，保存10天左右，在什么温度条件下保存呢？是否需要加入防腐剂？

要变成优秀的人

冷藏于4 ℃，加入甲苯或麝香草酚等防腐剂

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问为啥FISH和核质分离qPCR实验结果不一致？

huarenqiang5

一个样品，可同时分别提取细胞质RNA与细胞核RNA，提取的RNA可直接用于下游应用：RT-PCR, qRT-PCR, RNA-Seq, Northern blotting, chip-Arrays等。

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问干预研究，自身前后对照，结局为连续变量，如何计算样本量

loveliufudan

如果没有找到类似文献获取总体样本的均值和标准差，那么可以考虑进行预实验来估计这些参数。预实验的样本量取决于研究的类型和目的，通常可以使用10-20个样本进行预实验。另外，还有其他计算方法可以考虑，如：1.Wilcoxon符号秩和检验：非参数性的统计检验，用于检验两个样本的中位数是否相等。2.Mann-Whitney U检验：非参数性的统计检验，用于检验两个样本中值是否相等。3.Kruskal-Wa

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问统计学求助，急

虫博士的丁香园

建议采用前者思路进行数据处理，最好多参考一些文献。

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问293T 包病毒求助

loveliufudan

可能是由于转染过程中的毒性或者质粒过量导致的。293T细胞转染时,很容易因为质粒过量或者质粒毒性而导致细胞不能正常生长。细胞变圆可能是因为细胞膜受损或者细胞死亡。建议减少质粒的转染量，或者使用更低的转染浓度，并在转染后尽早换新培养基，来改善细胞的生长状态。

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问请教大小鼠前庭冰冻切片包埋时的摆放位置，和切片的方向，求高人指点，救救孩子吧！

loveliufudan

前庭冰冻切片包埋时，摆放位置和切片方向对于观察组织结构是很重要的。1.摆放位置：通常将组织放在切片中心，以便获得较好的观察质量。2.切片方向：通常从组织的中央切片，以便获得最佳的观察质量。3.球囊和椭圆囊的囊斑：一般可以在同一张片子上观察到。4.毛细胞的形态：毛细胞是很小的，需要使用高倍镜察看，如果不能看到可以考虑重新切片，使用更细的刀片，或者重新包埋。需要注意的是，摆放位置和切片方向可能会因实验

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问IPSC培养问题

loveliufudan

可能是由以下原因导致的。1.细胞密度过高：如果细胞密度过高，细胞间的竞争会导致细胞质量下降。2.温度过低或过高：细胞对温度敏感，温度过低或过高都会影响细胞生长和增殖。3.氧气浓度过高或过低：细胞对氧气浓度敏感，氧气浓度过高或过低都会影响细胞生长和增殖。4.污染：细胞容易受到细菌、酵母、霉菌等微生物的污染，影响细胞生长和增殖。5.培养基不新鲜或过期：培养基过期或不新鲜可能导致细胞质量下降。6.培养基

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问两种不同细胞共培养的培养基选择

loveliufudan

可以考虑使用组合培养基，如将DMEM和1640培养基混合使用，根据不同细胞类型的生长需求调整比例。或者使用组合培养基，如EBM-2或M199, 其中含有足够的氧气和营养物质来支持两种细胞的生长。不过还需要添加必要的补充物如EGF和bFGF来促进树状细胞的生长。

2 回答202 围观

问请问一下dmem/F12培养基是含有bfgf吗？

毛利小五郎的徒弟

排除污染的可能性的话是否是有序列类似的蛋白在干扰

4 回答148 围观

问怎么判断细菌是否是革兰阳/阴氏菌?

huarenqiang5

革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌是指根据革兰染色法进行的细菌分类，常见区别如下：1、染色不同：细菌先由碱性染料结晶染色，再经碘液媒染后使用酒精脱色，一定条件下部分细菌不脱色而部分细菌脱色。前者称之为革兰氏阳性菌，后者称之为革兰氏阴性菌。为便于观察，细菌脱色后再使用碱性番红等红色染料进行复染，此时阳性菌仍呈紫色，而阴性菌则被染为红色；2、结构不同：革兰氏阳性菌细胞壁的肽聚糖较厚且具有磷壁酸，但不具外膜，而

5 回答160 围观

问求问LB平板都可以培养哪些菌株，长势比较好的？

huarenqiang5

LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。可以培养沙门氏菌等。

2 回答267 围观

问摇菌不出来

c_Yeats

要不你换锥形瓶试试？50ml锥形瓶试试。

3 回答379 围观

问想问过滤细菌的滤头要买什么材质

毛利小五郎的徒弟

一般都是尼龙和聚酯纤维，有些使用高分子材料

3 回答50 围观

问请问大蜡螟毒力实验的低毒对照一直死很多怎么办呀？

清清冷风

考虑应该是菌落浓度过高导致的实验误差，建议可以适当降低一些再实验看看。

3 回答126 围观

问关于CCK8 test的疑问，求大神回答

loveliufudan

使用CCK8检测来确定适当的辐射剂量的方法是：将不同剂量的辐射用于细胞，然后在不同时间点测量细胞活力。通常情况下，当细胞暴露于较低剂量的辐射时，细胞活力可能会增加，但是当细胞暴露于较高剂量的辐射时，细胞活力可能会减少。因此，在使用CCK8检测时，通常选择OD值接近1的剂量是最适合的，因为这意味着细胞活力保持较高水平。但是，在选择适当的辐射剂量时，还应该考虑到其他因素，例如细胞类型和细胞对辐射的敏感

3 回答104 围观

问枯草芽孢杆菌菌液是絮状的吗？

huarenqiang5

考虑是纤维类沉淀，建议及时处理。

2 回答128 围观

问求助关于统计的问题（COX回归）

毛利小五郎的徒弟

改成重复测量数据基础上进行COX回归吧，会好一些

1 回答95 围观

问transwell共培养请教

dxyc42u

我们做的时候都换成了无血清的。

2 回答361 围观

问有没有大神做过硝苯地平的cck8吗？

毛利小五郎的徒弟

首先CCK8的说明书大家一定要认真阅读，里面很多细节的问题都有提到。而且说明书里提供的一些关于各种细胞的种板数都很有参考价值，因为那是反复验证过的最佳数值。但无论如何，做这个试验一定要摸条件。你就算再懒，这个懒不得，否则你都只是在做无用功。以下言论全部以细胞毒性试验为前提，如果你做的是促进细胞生长的药物的药效实验那就另当别论了。摸条件包括1、种板数；2、种板后细胞的贴壁生长时间；3、加药后的孵育时

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