山海FCCB
求助,本人新手,想问一下大家蓝白斑筛选出现这样,用的PET载体,卡那霉素,培养了14h。之前做的发现只有边缘长连成片的菌斑,基本是蓝色的!中间几乎不长,这次的如图,请问这是怎么回事啊!求助求助!
土井挞克树
考虑是抗生素浓度太高抑制了菌斑的生长。
dxyc42u
很可能是抗生素浓度问题,可以再摸索下
loveliufudan
有几种可能导致这种情况:
1. 菌落密度过高:如果您在接种菌落时使用了大量的初始细胞,菌落之间可能会过于拥挤,导致中间的菌落生长受限。
2. PET载体选择不当:不同类型的PET载体可能对不同的菌株表现出不同的效果。您可能需要评估使用其他类型的载体,以获得更好的表达和分离效果。
3. 培养时间不足:14小时的培养时间可能不足以让所有菌落充分生长。您可以尝试延长培养时间,例如24小时,以促进中间区域的菌落生长。
4. 抗生素选择和浓度问题:卡那霉素是一种广谱抗生素,但不同的菌株对抗生素的敏感性可能有所不同。您可以重新评估抗生素的使用浓度,或尝试其他适用于您菌株的抗生素。