小鼠肺组织

胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。胶原酶的使用浓度一般为0.1- 5mg/ml，消化过程中可以搅拌以促进酶的消化。胶原酶在消化的过程中可以引起细胞的少量死亡，一般消化时间为15min至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中首选的缓冲液为含钙离子和BSA的Krebs Ringer Buffer。在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶量，同时可以加入0.5%BSA或5-10%血清来稳定细胞的状态和消化效果。胶原酶的灭菌首先离心或者用0.8µm的滤器去掉不溶物。然后再用0.2µm的滤器过滤除菌。盐酸苯甲脒和TLCK联合作用可以与该酶成分中大部分的蛋白酶结合而抑制其活性，但是他们却不会抑制胶原酶的活性。其中盐酸苯甲脒的浓度一般为1mM，TLCK的浓度一般为0.100-0.135 mM。值得注意的是两者不能完全保证所有蛋白酶的活性均被抑制。

100mg 1g

胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离，将结缔组织分离成单个细胞。

溶解性：可溶于TES缓冲液，Hank's平衡盐和Earles平衡盐等溶液。溶液在-20℃可稳定保存数月。

胶原酶Ⅴ（来源溶组织梭菌）包含至少 7 种蛋白酶成分，分子量从 68-130KD 不等。它可用于胰腺小岛组织的分离， 将结缔组织分离成单个细胞。消化软骨组织的浓度一般为 1-2 mg/ml，消化肝脏组织大约 1 mg/ml。 但是具体的消化浓度因种属特异性而异。很多文献指出胶原酶可以消化多种组织，胶原酶的使用浓 度一般为 0.1- 5 mg/ml，消化过程中可以搅拌以促进酶的消化作用。胶原酶在消化的过程中可以引起 细胞的少量死亡，一般消化时间为 15min 至数小时。如果浓度发生变化那么消化时间可能更长。消化过程中首选的缓冲液为含钙离子和 BSA 的 Krebs Ringer Buffer。 在消化的过程中如果细胞大量死亡则需要降低酶量，同时可以加入0.5%BSA或5-10%血清来稳定细胞的状态和消化效果。胶原酶的灭菌首先离心或者用0.8µm的滤器去掉不溶物。然后再用0.2µm 的滤器过滤除菌。 对于组织培养方面的应用，胶原酶可以用不含钙离子的溶液配制如hanks，ebss等。

据此两者差别不大。

制备小鼠肺组织单细胞悬液可以使用胶原酶4或胶原酶5，两者的作用机理是类似的，都是通过消化胶原蛋白降解细胞外基质来释放单细胞。然而，它们的消化效果可能略有不同，具体的差别还需要具体实验进行比较。在实验设计时，可以根据自己的需要和实验室的经验来选择使用哪一种酶。

区别不大都可以，胶原酶5效果好一些。