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为什么只能在10微米以上情况下使用 Triton-X100?

相关实验:小鼠脑片免疫组织化学(ABC 法)实验

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趴趴不软

在什么情况下使用 Triton-X100?推荐是10微米以上的厚切片才使用,那10微米以下的切片该用什么呢?或者就是要用Triton-X100处理薄切片,不行吗?会有什么损伤吗?

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3 个回答

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sswei

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Triton X-100是非离子型表面活性剂,在4%多聚甲醛固定过程中起着增加细胞膜通透性的作用! 是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂),该产品经常被用于水中帮助分解蛋白酶;但是,必须使用尽可能低的浓度否则会污染样品。高浓度可以裂解细胞,而低浓度可以增加细胞膜的通透性。Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)能够溶解细胞脂质,他可以增加细胞膜对抗体的通透性。在免疫细胞化学中,Triton X-100最为常用浓度是1%和0.3%,其中1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本,0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清。因此对薄的切片容易造成伤害。

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loveliufudan

有帮助

对于切片样品,使用 Triton-X100 处理的目的通常是为了促进抗体与靶分子的结合,增强信号。对于厚切片(10微米以上)来说, Triton-X100 可以更好地渗透到样品中,破坏细胞膜或细胞间质,使抗体可以更好地与分子结合并产生信号。对于薄切片(小于10微米), Triton-X100 处理可能会对样品造成损伤或失真,因此使用 Triton-X100 处理薄切片时需要小心谨慎,可以适当减少处理时间和浓度,或者考虑使用其他的处理方法。

在使用 Triton-X100 处理样品时需要注意的是, Triton-X100 可以破坏细胞膜和细胞间质,因此需要适当控制浓度和处理时间,避免对样品造成过度损伤。同时,在使用 Triton-X100 处理样品时,还需要考虑样品的性质和实验需要,选择合适的处理条件和浓度,以获得最佳的实验效果。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

Triton X-100化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚,是一种去污剂。在免疫组织化学(>10um厚切片) 和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通透剂,在膜上打孔。如果切片过薄,反而会融化切片

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