cleaved caspase3蛋白做免疫组化的时候，用什么抗原修复方式最好，破膜比例多少合适？

一般建议用微波加热修复法推荐的修复液：常用柠檬酸盐缓冲液（pH=6.0）。

对于 cleaved caspase 3 蛋白的免疫组化实验，一般使用热诱导抗原修复（heat-induced epitope retrieval，HIER）方法，常用的缓冲液有 Tris-EDTA 缓冲液和 Citrate 缓冲液。

HIER 方法的最佳条件需要根据具体的试剂和标本来确定，一般建议进行一系列的试验和优化。以下是一些常见的优化参数：

热处理温度：常见的温度为95-100°C，但具体温度需要根据样本特性和试剂而定。

热处理时间：一般建议在10-30分钟之间，具体时间需要根据试剂和样本而定。

缓冲液选择：如前所述，常用的缓冲液有 Tris-EDTA 缓冲液和 Citrate 缓冲液等，选择适合的缓冲液需要进行试验。

pH 值：pH 值的选择需要根据缓冲液而定，一般建议在6.0-9.0之间。

另外，对于破膜比例，一般建议不要过高，否则可能会导致细胞形态变形，影响结果的准确性。一般建议在10%左右的破膜比例即可。需要注意的是，破膜比例也会受到热处理温度、时间和缓冲液等因素的影响，需要进行适当的优化。