丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

求助:大鼠脊髓背根神经节神经元DRG细胞的培养,DRG原代培养

相关实验:脊髓损伤动物模型

user-title

有由_wjx3

有没有大神可以告诉我一下 DRG原代培养的培养基用什么好呀

或者有没有protocol,我这边准备用乳鼠提取DRG来做原代

完全就是科研小白

wx-share
分享

2 个回答

user-title

loveliufudan

有帮助

DRG原代培养是一种用于研究神经细胞和神经胶质细胞的重要方法。以下是一个可能有用的基本的原代培养方案,供您参考:

材料:

DMEM/F12培养基

FBS

神经营养因子(NGF、BDNF等)

阿霉素和链霉素抗生素

酶消化液(例如: papain、collagenase、trypsin 等)

70% 乙醇

磷酸盐缓冲液(PBS)

步骤:

从小鼠胚胎中获取DRG组织,并在PBS中清洗去除血液和其他杂质。

将DRG组织用含有酶消化液的DMEM/F12培养基缓慢转动摇晃,以将其分解成单个细胞。消化时间因所用酶的种类和组织大小而异,一般需要30-90分钟。

停止消化反应,加入等体积的FBS,离心沉淀,去掉上清液。将细胞重悬于DMEM/F12培养基中。

通过细胞计数,计算所需的细胞数,将细胞分配到含有NGF和BDNF等神经营养因子的DMEM/F12培养基中。添加阿霉素和链霉素以防止细菌污染。

在37°C的培养箱中培养,更换新的培养基每2-3天一次,直到细胞达到足够数量。

请注意,以上是一个基本的DRG原代培养方案,具体步骤和条件可能会因研究目的和所用动物的不同而有所差异。

user-title

毛利小五郎的徒弟

有帮助

可以用DMEM完全培养基(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )

user-title

有由_wjx3user-title

需要增加其他的营养因子吗?或者直接用神经元培养基可以吗

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序