Dr_劉医生
大致取大鼠的主动脉步骤如下:
首先,水合氯醛腹腔注射麻醉;
然后,用外科剪刀、有齿镊,由会阴部至颈部逐层解剖大鼠;
翻开胸腹内容物,在双肾间寻找腹主动脉分叉处,进而综合用眼科剪、血管钳等,分离至主动脉弓一段的主动弓,剪取下来固定
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首先找准主动脉的位置 应该位于腹腔深部 附着于背侧肌肉层上面 外表白色的血管 韧性很强 分支很多,然后分离主动脉外膜,游离主动脉。
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操作要点:
1. 鼠尾静脉匀速注射100 ul calciumNIR和/或100 ul cathepsin NIR。注射结束后,停顿5秒后,撤回针。注射后3-24小时取主动脉。
2. 取完整主动脉:
(1)用200mg / kg腹腔注射戊巴比妥注射剂剂量安乐死小鼠。
(2)将动物仰卧在解剖板上固定。在解剖显微镜下,用手术剪做一个中线切口从下腹部延伸到上胸部。
(3)用镊子剥去皮肤,取出腹膜,露出腹部器官。取下胃肠器官,小心不要横切主动脉。
(4)在前膈肌做一个横向切口,继续切开腹部。使用解剖剪刀,切开肋骨的侧面并去除附着在胸骨上部的软组织。去除胸腔,显露肺部。
(5)将心脏留在原位(以帮助识别和解剖主动脉近端),小心地取出肺部。去除胸腺,
气管和食道,确保主动脉保持完好。
(6)用直镊和显微解剖剪刀从髂分叉到主动脉去除主动脉周围的软组织,在去除主动脉周围脂肪时要格外小心。清除主动脉弓分支(即头臂动脉,颈总动脉和锁骨下动脉)周围的剩余脂肪和软组织。
注意:因为在进行荧光成像时脂肪会增加背景信号,所以去除主动脉中的脂肪是很重要的。
(7)将心脏从胸腔中取出,小心从近端主动脉上分离,并去除。在髂骨上远端主动脉切开
分叉。使用胰岛素针,从主动脉弓注射生理盐水到主动脉,洗掉剩余的血细胞。分开
主动脉以及主动脉弓血管,将其从小鼠体内完全除去。
(8)将主动脉置于生理盐水溶液中,直到成像。
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