STO饲养细胞制备
RETTTTZ
我在细胞长满后，用1ug/ml的mmc处理12h后，用pbs清洗3遍后，使用0.05e消化4min，离心后用fbs：dmso 9:1的冻存液冻存，但是复苏后细胞长2-4天就出现了明显的死亡，根本不能正常培养干细胞
之前按这个方法做的饲养细胞没有问题，但这次做的就不行，所以材料操作均没有改变，想知道大家有遇到这种情况的吗，是怎么解决？
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3 个回答
huarenqiang5
有帮助
考虑是你是不是离心时间的问题或其他操作方面的问题导致。
Dr_劉医生
有帮助
试试用高浓度的丝裂霉素C（10mg/ml MMC)处理4h，低浓度的mmc处理12h太长了，效果并不好
RETTTTZ
sto1是之前制作没有问题的，用的也是1ug/ml处理12h
sto2、3是新做的，分别用的10ug/ml处理3h和1ug/ml处理12h，其他条件都一样，但细胞状态在第4d就明显变差，也不能正常培养干细胞
土井挞克树
有帮助
降低细胞密度后，多用pbs清洗几次。
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