求助：小鼠MACO手术相关技巧：

本人最近在做小鼠MACO模型，但是TTC染色一直显示没有梗死灶，

相关操作如下：小鼠选用30-35g昆明小鼠，线栓根据生物公司买的标准线栓规格使用鱼线自制（标准线栓长度为3cm，适用于30g-35g小鼠，距头端2cm处有点，鱼线直径为0.165mm，略粗于标准线栓），从颈总插管，鱼线插入深度约在2cm附近，至略有阻力为金标准，梗死时间为60min，线栓拔出至体外长度有1.5cm剪短。做了15只了，染色结果一直不好（图1），今天试了试75min，表征更明显了，但是染色就是死活染不出（如图2）有没有大佬解答一下，救救孩子